细胞功能实验

细胞功能实验

  • 细跑增殖/调亡/周期/衰老检测
  • 细胞迁移及侵袭
  • 活性氧检测
  • PKH26染色

服务特色

金开瑞的细胞学技术团队常年从事蛋白生物活性分析等方面检查和研究,具备丰富的经验。自有的数十种库存细胞可以满足多数常见肿瘤细胞分析应用需要。拥有武汉生物技术研究院仪器共享平台,配备Beckman Moflo XDP超速流式细胞系统等国际领先水平的仪器设备。

服务介绍

细胞功能实验是一种用于研究生物分子、细胞和组织在生理和病理状态下的功能的实验方法。这些实验可以揭示分子机制、代谢途径、细胞信号通路等方面的信息。常见的细胞功能实验包括细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、分化、分泌、内吞作用等。这些实验通过对细胞的操作、观察和测量,可以深入了解分子与细胞的生理与病理状态,为研究生物学、医学、药物研发等领域提供有力的支持。

常见问题

Q:什么是Annexin V/PI双染?

Annexin V可特异性结合于凋亡细胞膜外翻的磷脂酰丝氨酸,PI只能穿透晚期/死亡细胞的细胞膜对核着色,使用Annexin V/PI双染可以将未凋亡、早期凋亡、晚期凋亡的细胞群体比例显示出来,数据通过流式细胞术或荧光显微镜获得。

Q:什么是PI染色法?

DNA染料碘化丙啶PI(Propidium Iodide,PI)可以嵌入到DNA双螺旋碱基之间并与之结合,结合量与DNA的含量成正比,而PI的量是与荧光强度是成正比的,后者可以通过直方图中的通道数反应出来。 该实验用于肿瘤病理学中判断肿瘤的增殖状态和倍体分析;用于分析药物对细胞增殖的影响。

Q:细胞类检测需要多少样品?

每一份独立样品的最低需要量,动物细胞>2x10^7,动物组织>400mg,植物组织>2g。请尽量提供更多样品,便于我方进行预实验、提高成功率。 细胞可以提供培养瓶或冻存细胞,由我方验收后培养(或复苏);也可以收取足量细胞后速冻、-80保存至寄送。 动植物组织样品需在离体后尽快液氮速冻、-80保存至寄送。植物组织尽量选取幼嫩新鲜部分。 样品寄送须使用足量干冰。

Q:细胞增殖相关实验有哪些?

细胞增殖相关实验包括有MTT/CCK8、EdU掺入、(软琼脂)克隆形成和细胞周期检测。 MTT/CCK8:一般在基因表达水平干预、细胞因子或药物干预等条件下,培养细胞后加入MTT/CCK8,反应的是细胞总体代谢活力水平,通过多孔板光度计(酶标仪)获取数值,可绘制细胞的生长曲线。 EdU掺入:在细胞培养过程中EdU,通过DNA合成水平,反应细胞增殖状态及比例,后续通过荧光显微镜或流式细胞仪获取数据。 (软琼脂)克隆形成:不同干预处理的细胞,在培养孔板中或铺有低熔点琼脂糖的培养孔板中,培养2周左右观察其形成单克隆的能力。软琼脂克隆形成主要用于悬浮细胞,或者在研究贴壁细胞的抗失巢凋亡(anoikis)能力时。 细胞周期:实验细胞经过PI染色后,进行流式细胞术分析,可以获得细胞在各个细胞周期(G1/G2/M)的分布比例。

Q:什么是Transwell迁移/侵袭?

Transwell小室上下层由聚碳酸酯膜分隔,膜上有3-8μm不同规格孔径的小孔。不铺Matrigel胶时细胞的穿膜过程体现其迁移能力;当铺有Matrigel胶时细胞穿膜需分泌基质金属蛋白酶(MMPs)等基质水解酶类,此时体现的是细胞的侵袭能力。所得数据为显微镜下拍照及细胞计数结果。

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