服务介绍
大肠杆菌重组蛋白表达利用大肠杆菌细胞内的转录和翻译机制来合成外源基因中的目标蛋白质。通常通过将目标基因插入到表达载体中，该载体包含适当的启动子和调控序列，以控制目标蛋白质的表达水平。
金开瑞蛋白表达平台已成功为全球各地客户提供3000余种重组蛋白产品，涵盖人类疾病相关蛋白（细胞因子、激素、酶、病毒抗原、重组抗体、片段抗体）、动植物蛋白和微生物蛋白。
服务优势
- 高表达水平：大肠杆菌能够实现高水平的目标蛋白质表达，提供大量蛋白质产物。
- 简单和经济：大肠杆菌的培养和维护相对简单，成本较低。
- 快速表达：大肠杆菌具有较短的生命周期，可以迅速表达目标蛋白质。
- 易于遗传操作：大肠杆菌有丰富的遗传工具和表达载体，便于遗传操作和蛋白质工程。
- 多样化的宿主菌株：有多个可选的宿主菌株，适用于不同表达需求和表达策略。
- 适用于小型蛋白质：大肠杆菌表达系统对小型蛋白质如多肽和酶等的表达效果较好。
服务流程
服务说明
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服务名称 |
服务内容 | 交付内容 | 服务周期 |
| 普通型大肠杆菌重组蛋白表达 | 表达载体构建 |
表达质粒 |
1周 |
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测序报告 |
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| 感受态转化 |
表达菌株 |
3工作日 | |
| 表达菌株筛选 |
SDS-PAGE图谱 |
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| 蛋白表达纯化 | 蛋白纯品(>90%纯度) | 2-3周 | |
| 标签切除 |
SDS-PAGE图谱 |
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| 包涵体复性 |
蛋白纯品(>90%纯度) |
2-3周 | |
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SDS-PAGE图谱 |
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| 上清保证型大肠杆菌重组蛋白表达 | 表达载体构建 |
表达质粒 |
1周 |
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测序报告 |
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| Arctic表达菌株筛选 |
表达菌株 |
3工作日 | |
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SDS-PAGE图谱 |
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| 蛋白表达纯化 | 蛋白纯品(>90%纯度) | 3-4周 | |
| 标签切除 |
SDS-PAGE图谱 |
案例展示
大肠杆菌表达系统
1. GFP蛋白原核表达通常以包涵体形式表达，普通光源下极难观察到绿色荧光。金开瑞通过对GFP序列进行突变，并对启动子进行筛选，优化培养条件，控制表达速率，用大肠杆菌表达的GFP蛋白，完全以可溶形式表达，自然光下可见强烈的绿色荧光。
2. 客户经过尝试在大肠杆菌DE3中表达目的蛋白A，未能获得上清蛋白，金开瑞采用Arctic Express表达体系，采用低温诱导和分子伴侣共表达方式，历经40个工作日，获得了在上清中表达的目的蛋白，得到客户的认可。
3. 客户经过尝试在大肠杆菌DE3中表达目的蛋白B，目的蛋白表达为包涵体。但是客户需要上清表达的蛋白进行后续实验，经过金开瑞Arctic Express表达体系，历经35个工作日，获得了在上清中表达的目的蛋白。
相关资源
大肠杆菌重组蛋白表达技术在生物制药、工业酶生产、研究用蛋白质合成、诊断试剂生产以及蛋白质工程和改造等领域都具有广泛的应用。例举如下：
1、生物制药：大肠杆菌重组蛋白表达是制备生物制药品的重要方法之一。它被用于合成各种重组蛋白药物，如重组抗体、人类蛋白激素、疫苗等。这些药物用于治疗癌症、炎症性疾病、免疫缺陷等疾病。
2、工业酶的生产：大肠杆菌重组蛋白表达被广泛应用于合成各种工业酶，如纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶等。这些酶在纺织、食品、洗涤剂等工业中起着重要作用。
3、研究用蛋白质的合成：大肠杆菌重组蛋白表达用于合成研究所需的蛋白质。研究人员可以通过表达目标蛋白质来研究其结构、功能、相互作用等。这对于生命科学研究、药物发现和基因工程等领域具有重要意义。
4、诊断试剂的生产：大肠杆菌重组蛋白表达被用于生产各种诊断试剂，如酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒、免疫印迹试剂盒等。这些试剂用于临床诊断、疾病监测和药物筛选等应用。
5、蛋白质工程和改造：大肠杆菌重组蛋白表达可用于进行蛋白质工程和改造。通过改变目标蛋白质的基因序列，可以实现蛋白质的定点突变、融合蛋白质的构建、蛋白质标记和纯化等。
需要注意的是，大肠杆菌重组蛋白表达系统虽然在很多应用中被广泛使用，但也存在一些局限性。例如，大肠杆菌可能无法正确表达复杂蛋白质或进行特定的翻译后修饰。因此，对于特定的蛋白质和应用需求，需要综合考虑其他表达系统的优势和限制，从而选择最合适的表达方法。
