酵母细胞表达系统

酵母细胞表达系统

  • 酵母蛋白表达
  • 稳定表达
  • 高产量

服务特色

酵母表达系统是一种最经济高效的真核蛋白表达系统,可以成功实现胞内表达或是分泌表达,且其放大培养基相对廉价,培养条件要求不高,适宜工业放大。与哺乳动物细胞表达系统一样,酵母蛋白表达系统能够对所表达蛋白进行例如糖基化、酰基化、脂基化、磷酸基化等保证蛋白天然构象的修饰,可用于制备非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。

服务介绍

毕赤酵母表达系统是一种利用毕赤酵母(Pichia pastoris)作为宿主细胞的表达系统,通过将外源表达载体导入到毕赤酵母细胞中,实现目标蛋白质的高效表达。毕赤酵母是一种真菌,与酵母属中的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)相似,但其具有更高的分泌能力和较低的内源蛋白质污染。

武汉金开瑞生物工程有限公司的酵母蛋白表达平台由多年从事酵母表达操作的实验人员组成,经验丰富,采用自行改造的高效分泌载体和宿主组合,可在最大程度上实现最高质量的蛋白表达。经客户反馈,以我平台所制备的蛋白原料为抗原所制备的单抗均具有很好的识别天然蛋白的优良特性。

服务优势

  • 高表达水平:能够实现高水平的蛋白质表达,比大肠杆菌表达系统更高。
  • 蛋白质折叠和修饰能力强:具有完善的细胞器和分泌机制,能够进行复杂蛋白质的折叠和修饰。
  • 稳定表达:选择适当的启动子和调控元件,实现长期稳定的蛋白质表达。
  • 高产量和可扩展性:细胞生长速率和密度高,适合大规模生产。
  • 纯化和应用方便:通过简单的离心和过滤等步骤,容易从培养基中纯化目标蛋白质;广泛应用于蛋白质研究和应用领域。

服务流程

方案沟通
接收订单
质粒构建
蛋白表达
蛋白纯化
成果交付

客户提供

目的蛋白信息或基因序列,质粒(也可以选择由金开瑞提供);

蛋白询价信息表(请点击下载中心,下载蛋白询价信息表后详细填写)。

最终交付

  • 纯化后蛋白纯品、表达菌株(收费);
  • 蛋白表达结题报告,包括测序报告、实验条件、蛋白表达纯化检测结果。

服务说明

服务类型

细分

交付结果

周期

酵母重组蛋白表达-科研用

亚克隆

表达质粒

2

小量表达与筛选

转化酵母G418平板10PCR鉴定及小量检测

PCR鉴定结果,小量SDS检测结果

4-5

200ml体系的放大诱导表达与纯化

200ml体系纯化所得蛋白

2-3

诱导表达及纯化

1mg纯度在85%以上的目标蛋白

2-3

酵母重组蛋白表达-工业用

基因合成

/

/

载体构建及转化鉴定

重组质粒10ul,测序报告, PCR阳性鉴定图

3-4

200ml体系表达

SDS检测结果

3-4

200ml体系纯化

200ml体系纯化所得蛋白(如果未纯化出蛋白则不交付)

1-2

扩大表达1mg

SDS-PAGE检测图,1mg蛋白纯品

3-4

 

服务名称

服务项目 服务内容 交付结果 服务周期
酵母细胞表达服务经济型套餐 原核克隆

基因的获得

核酸电泳图片 2周

PCR扩增产物酶切连接到合适的载体

转化DH5α

重组质粒大量制备

线性化重组质粒

优化表达

电转化适宜的酵母宿主

酵母核酸电泳图 2-3周
随机挑10株单菌落进行PCR鉴定
表达及纯化 从PCR鉴定阳性菌落中选取一株做1L体系的放大表达 最终纯化产物SDS-PAGE及WB 1-2周
发酵液上清处理及一步纯化
纯化产物SDS-PAGE及Western Blot 1 L上清的纯化产物
酵母细胞表达服务标准型套餐 原核克隆

基因的获得

核酸电泳图片 2周
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体

转化DH5α

重组质粒大量制备

线性化重组质粒

优化表达

电转化适宜的酵母宿主

酵母核酸电泳图 5-6周
用遗传霉素G418进行多拷贝子筛选
对多拷贝子克隆进行RCR鉴定
选取40株多拷贝子进行小量诱导表达 最终种子表达上清SDS-PAGE图
表达及纯化 选取表达情况最好的,根据客户需要放大表达 最终纯化产物SDS-PAGE及WB 1-2周
发酵液上清处理及一步纯化
纯化产物SDS-PAGE及WB 1L上清的纯化产物

案例展示

相关资源

毕赤酵母表达系统的应用:

    1、蛋白质生产:毕赤酵母表达系统被广泛应用于高效合成和分泌各种重组蛋白质,包括酶、抗体、细胞因子等。它可以实现高表达水平和高产量的目标蛋白质生产。

    2、疫苗研发:毕赤酵母表达系统被用于合成和表达疫苗蛋白质抗原,用于疫苗研发和生产。它可以实现病原体蛋白质的高效合成,并具有适当的蛋白质折叠和修饰机制。

    3、药物筛选:毕赤酵母表达系统可用于高通量药物筛选,特别是针对靶标蛋白的筛选。通过构建毕赤酵母表达库,可以筛选出具有特定活性的化合物,用于药物发现和评估。

    4、酶工程:毕赤酵母表达系统被广泛用于合成各种工业酶,如纤维素酶、淀粉酶、脱氧核苷酸酶等。它可以实现高酶活性和高产量的工业酶生产。

    需要注意的是,毕赤酵母表达系统也具有一些限制,如可能存在蛋白质折叠和修饰的差异,特定的翻译后修饰可能无法实现。因此,在选择毕赤酵母表达系统时,需要考虑目标蛋白质的特性、表达需求和应用要求,并结合其他表达系统进行综合评估。

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