荧光素酶互补成像实验报告分析
信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2023-10-13 17:06:41
荧光素酶互补成像分析实验方法:
1、克隆目标蛋白质基因片段至荧光素酶N端(NL)和C端(CL)的表达载体中,并分别转染至HEK293T细胞中。
2、待细胞达到一定密度后,使用CO2细胞培养箱调节细胞生长环境,使细胞保持健康生长。
3、将荧光素酶底物D-luciferin加入细胞培养液中,激发荧光素酶发光。
4、使用荧光素酶互补成像仪对发光的细胞进行成像捕获。
5、根据需求,可添加不同的荧光素酶底物,以及使用不同的成像模式(例如计数模式或强度模式)来获取更多的信息。
实验结果
根据荧光素酶互补成像实验,我们观察到在HEK293T细胞中,目标蛋白质的NL和CL端分别与其互作蛋白的CL和NL端互补结合,形成了荧光素酶复合物。通过成像捕获,我们观察到在细胞内荧光素酶复合物形成后,荧光素酶底物D-luciferin被激发发出荧光信号。此外,我们还观察到在不同时间点或条件下,荧光素酶复合物的形成与解离的动态变化。
结论
荧光素酶互补成像分析是一种有效的方法,能够帮助我们研究目标蛋白质的相互作用关系及其动态变化,对于深入理解细胞生物学过程有着重要意义。
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