产品说明
M-MLV Reverse Transcriptase是经基因工程改造的反转录酶，降低了RNase H活性，提高了热稳定性，可以比野生型的M-MLV在更高的温度下合成第一链cDNA。本产品在50-60°C均有正常活性，具有更高的特异性、更高的产量且可以合成长达12 kb的cDNA。
产品介绍
MMLV逆转录酶是由Moloney鼠白血病病毒来源的M-MLV基因经突变筛选，并通过大肠杆菌表达获得的反转录酶。该酶具有更高的温度耐受性，适用于高温反转录，有利于消除RNA高级结构与非特异性因素对cDNA合成的不利影响，具有更高的稳定性和反转录合成能力。
产品特点
耐高温：可在50-60℃高温条件下进行逆转录，并且反应保持稳定；
反转录效率高：针对低浓度RNA模板，保证合成效率和成功率；
产品应用
第一链 cDNA 合成，用于 RT-PCR 和RT-qPCR
合成 cDNA，用于克隆和表达研究
产品数据
1、与同类产品SDS-PAGE电泳检测对比
Line 1、2、3：CSB-DEM025 M-MLV逆转录酶
Line 4：某品牌M-MLV 逆转录酶
图1. CSB-DEM025 M-MLV逆转录酶与同类产品SDS-PAGE电泳检测
2、与竞品酶对比测试
图2. CSB-DEM025 M-MLV Reverse Transcriptase与同类产品的逆转录温度测试
3、加速热稳定性
图3. CSB-DEM025 M-MLV Reverse Transcriptase 37℃加速热稳定性
产品组分
产品参数
操作说明
第一链cDNA合成 (简易流程)
按下表添加并混合各组分，55°C孵育0.5H。如果使用随机引物，建议在55°C反应前先将反应体系置于25°C反应5 min。
注：1 ng-1 µg 总RNA模板或50 pg-100 ng Poly(A)-RNA。在95℃ 3min使酶失活。对于下游PCR应用，逆转录产物的加入体积不应超过PCR反应总体积的1/10。
第一链cDNA合成 (标准流程)
如果需要变性模板RNA，请使用以下方案。
在无RNase的PCR管中加入RNA模板和d(T)23VN引物。
*注：1 ng-1 µg 总RNA模板或50 pg-100 ng Poly(A)-RNA。
将以上体系置于65°C下反应5min，使RNA模板/引物变性后短暂离心并迅速置于冰上2min。
然后向上述PCR管中加入以下组分：
混匀后，55°C孵育0.5H。如果使用随机引物，建议在55°C反应前先将反应体系置于25°C反应5 min。
95°C加热3 min使酶失活，逆转录产物储存在-20°C。对于下游PCR应用，逆转录产物的加入体积不应超过PCR反应总体积的1/10。
一步法RT-qPCR反应
推荐使用本公司优化的One Step RT-qPCR KIT进行测试。一般情况下一个反应推荐M-MLV Reverse Transcriptase浓度为0.5-2U/μL，扩增条件如下：
