产品说明
HiFi DNA Polymerase是一种基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶,和Pfu DNA Polymerase相比,HiFi DNA polymerase的性能得到大幅度提升,针对复杂的模板也能快速准确的完成PCR反应。其保真性显著提高。本产品配备了优化后的酶缓冲液,添加了PCR增强组分,使得该酶具有极强的扩增效率和广泛的模板适应性,适合复杂模板的扩增。其扩增产物为平末端。
产品介绍
HiFi DNA Polymerase是一种基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶,和Pfu DNA Polymerase相比,HiFi DNA polymerase的性能得到大幅度提升,针对复杂的模板也能快速准确的完成PCR反应。其保真性显著提高。本产品配备了优化后的酶缓冲液,添加了PCR增强组分,使得该酶具有极强的扩增效率和广泛的模板适应性,适合复杂模板的扩增。其扩增产物为平末端。
产品特点
纯度>95%,无核酸酶残留,宿主gDNA残留量低;
保真度高出 Taq 保真度百倍以上;
高效扩增高 GC 含量靶标、纯度不佳的 DNA 和长片段序列;
可提供含或不含上样染液的预混液。
产品应用
长片段PCR扩增
高GC模板扩增
DNA片段的克隆
产品数据
Line 1-4:高GC gDNA 1K、0.7K、0.5K、0.4K(GC含量60-80%)
Line 5-8:λ DNA 1K 、4K、6K、8K
图1. CSB-DEM042 HiFi⾼保真DNA聚合酶
产品组分
产品参数
操作说明
【注】:a.引物浓度:一般来说反应体系中引物终浓度为0.2uM即可得到较好的效果。反应性能较差时,可在终浓度0.1uM-1.0uM范围内调整引物浓度。
b.模板浓度:动植物基因组DNA 0.1~1ug,大肠杆菌基因组DNA 10~100 ng,λDNA 0.1~10 ng,质粒DNA 0.1~10 ng。如模板为未稀释cDNA原液,使用体积不应超过qPCR反应总体积的1/10。
c.聚合酶浓度:酶量可在0.25 - 1uL之间调整。通常情况下加大酶量可以提高扩增产量,但有可能会使特异性下降。
d.Mg2+ 和添加剂:大部分PCR反应体系中的Mg2+浓度应在1.0–5.0 mM范围之内,但对于一些扩增困难的样本,例如高GC的DNA样本,可能需要在PCR反应体系中加入添加剂,例如DMSO或甲酰胺等。
【注】:e.退火温度和时间:退火温度需要根据引物的Tm值进行调整,一般设置成低于引物Tm值3 ~ 5℃即可。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。