RIP试剂盒

RIP技术（RNA Binding Protein Immunoprecipitation，RNA结合蛋白免疫沉淀），是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术，是了解转录后调控网络动态过程的有力工具。该技术主要是运⽤目标蛋⽩的特异性抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来，然后经过分离纯化对结合在复合物上的RNA进行q-PCR验证或者高通量测序分析。

Q1：如何判断RIP实验成功？

RIP后WB检测IP组和input组检测到目的蛋白信号即判断RIP实验成功。

Q2：IP和IgG样本Ct值没有差异

多方面原因造成：

1.抗体没有富集到RNA，可更换抗体尝试；

2.IgG背景过高，可增加洗涤次数或减少免疫沉淀步骤RNA投入量。

Q3：溶解曲线异常

出现非特异扩增或有引物二聚体等情况，需重新设计引物。

Q4：拉下样本RNA浓度过低

1.样本投入量过少，考虑增加样本初始投入量。

2.裂解不完全，组织样本未研磨充分，或者用强裂解液进行裂解。

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