一起科研走花路,探索你不知道的酵母杂交筛选小技巧
一、 参与的男女嘉宾必须衣冠整齐,活力四射,双方到底是要见面的,最明显的就是会先打扮一下自己。那么酵母的相亲也不例外,优质的文库可供选择,诱饵的转化效率以及活力都要保持在一个较高的水平,茫茫蛋白,一眼望去-yeah excellent men!
二、 沉默就是破铜烂铁,陌生人第一次见面,想要相亲成功,沟通极其重要。如果不制造共同话题那必然是黯然退场。同理那酵母的相亲也一样,要么提高共转效率,要么控制好诱饵和文库的比例,增加相互碰撞的几率,速率不能过快,要给两个蛋白充分的时间结合产生相互作用,这样才能提高来电概率。
三、 感情除了有一见钟情,还有日久生情。所以杂交的筛选时间上也会有不同,可以根据具体诱饵具体控制分析,作用强弱可根据信号强弱进行判断,毕竟与诱饵匹配的另一半适合的有很多,信号最强的就是能使之怦然心动的另一位。
言归正传,文库构建筛选的流程通常如下所示:
1. 核酵母文库构建筛选实验流程
建库
双杂筛选
01
matting方式
02
共转
单杂筛选
2. 膜酵母文库构建筛选实验流程
建库
共转
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